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济南组培设备培养基的选择

作者:腾昊组培室 发布时间:2018-10-09 14:07 浏览次数:

文章来源:腾昊组培室

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济南组培设备培养基的选择:

1、选择合适的组培设备培养基  

选择合适的组培设备培养基是植物组织培养成功的基础。

选择合适的组培设备培养基主要从以下两个方面考虑:

一是基本组培设备培养基;

二是各种激素的浓度及相对比例。MS培养基适合于大多数双子叶植物,B5和N6培养基适合与许多单子叶植物,特别是N6培养基对禾本科植物小麦、水稻等很有效,White培养基适合于根的培养。首先试用这些培养基进行初步实验,可以少走弯路,大大;减少时间、人力和物力的消耗。当通过一系列初试之后,可再根据实际情况对其中的某些成分做小范围调整。在进行调整时,以下情况可供参考。一是当用一种化合物作为氮源时,硝酸盐的作用比铵盐好,但单独使用硝酸盐会使培养基的PH向碱性方向漂移,若同时加入硝酸盐和少量铵盐,会使这种漂移得到克服。二是当某些元素供应不足时,培养的植物会表现出一些症状,可根据症状加以调整,如氮不足时,培养的组织常表现出花色苷的颜色(红、紫红色),愈伤组织内部很难看到导管分子的分化;当氮、钾或磷不足时,细胞会明显过度生长,形成一些十分蓬松,甚至呈透明状的愈伤组织;铁、硫缺少时组织会失绿,细胞分裂停滞,愈伤组织出现褐色衰老症状;缺硼时细胞分裂趋势缓慢,过度伸长;缺少锰或钼时细胞生长受到影响。培养基外源激素的作用也会使培养物出现上述一些类似的情况,所以应仔细分析,不可轻易下结论。  

2、激素浓度和相对比例的确定  

组织培养中对培养物影响大的是外源激素,在基本培养基确定之后,实验中要大量进行的工作是用不同种类的激素进行浓度和各种激素间相互比例的配合试验。在实验中,首先应参考已有的报道,看是否有用相同植物、相同组织或相近者做过成功或失败的试验,如果有则可直接作为参考;如果没有,则在建立激素配比中,将每一种拟使用的激素选择3-5个水平,再按随机组合的方式建立起如下的实验方案。  

这样就设计出了16种激素配比的实验方案,即16种不同的培养基。用着16种培养基进行初试之后,你会找到1种或几种是比较好的。再在这些比较好的组合的基础上进行小范围的调整,设计出一组新的配方。如在表一中,您认为6号培养基较有希望,就可以在此基础上做出如表二的一组新的设计。  

表一两种激素4种浓度的组合试验

表一两种激素4种浓度的组合试验

表二   第二次激素配比实验

 第二次激素配比实验

有16种不同的组培设备培养基:  

一般来说,经过这次实验就可能选出一种适合于你的实验材料的培养基,或许不是好的,但结果是可靠的。在此基础上可进行培养基中其他成分的变动实验,如可变动蔗糖浓度、琼脂用量、培养基的PH或添加某些氨基酸等。但必须掌握一个原则,就是要有理有据,特别是对一些宝贵的植物培养材料,更要慎之有慎。  

如果上述试验失败,那就要做一些更细致、更麻烦的实验,花费更多的时间、人力和物力,而且好在专业人员的指导下进行,切莫根据想象来随意设计培养基,这样成功的概率极小,使宝贵的植物材料丢失,或失去时机。


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