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白鹤芋组培快繁体系建立的研究

作者:组培架 发布时间:2020-04-07 19:22 浏览次数:

文章来源:组培架

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  白鹤芋别名白掌、一帆风顺,是一种花叶兼赏型的中高档花卉,常用于布置客厅、办公室或各类大厦的大厅,也可用于装饰花篮、花束,具有较高的观赏价值和经济价值。

  由于白鹤芋的花粉退化,栽培很难结籽,通常可用分株方法繁殖。而分株繁殖速度慢,繁殖成活率系数低,种苗整齐度不均,不适合作为商品大量生产。植物组织培养是快速繁殖植物的最佳途径,不仅繁殖速度快,且变异率低。

  本试验以白鹤芋的顶芽为外植体,开展组培快繁研究,建立白鹤芋的组培快繁体系,为大规模生产白鹤芋种苗奠定基础。

组培设备

  1 材料和方法

  1.1 材料

  在生长健壮、无病虫害的白鹤芋植株上采集嫩芽作为外植体。

  1.2 试验方法

  1.2.1 外植体消毒

  采集的嫩芽用洗衣粉清洗干净,流水冲洗30 min,用75%的酒精消毒20 s,再用2%的次氯酸钠浸泡灭菌10 min,无菌水冲洗5次即可。

  1.2.2 丛生芽诱导

  将外植体分别接种于培养基MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+白糖30 g+琼脂7 g和MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 2 mg/L+蔗糖30 g+琼脂7 g中诱导丛生芽,50 d后统计丛生芽发生情况。

  1.2.3 不定芽增殖培养

  将白鹤芋丛生芽切分成单株,分别转接到附加6-BA 0.1、0.3、0.5、1.0、1.5 mg/L 5 种浓度和 NAA 0.2 mg/L 的 MS 培养基中,培养30 d后,统计瓶苗增殖情况。

  1.2.4 生根培养

  将生长健壮的无根试管苗转接到附加IBA 0.0、0.1、0.3、0.5、1.0 mg/L5种浓度的1/2 MS培养基中,进行生根培养。

  1.2.5 炼苗移栽

  当白鹤芋根系长至2~3 cm时,选择长势好、根系粗壮发达的瓶苗进行炼苗移栽。

  2 结果与分析

  2.1 白鹤芋丛生芽诱导效果

  实验证明,MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+白糖30 g+琼脂7 g和MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 2 mg/L+蔗糖30 g+琼脂7 g培养基都可以诱导白鹤芋形成丛生芽,但后者不定芽诱导较快、芽更饱满、丛生芽出现更早更多,萌芽率可达到98.2%。

  2.2 细胞分裂素6-BA对白鹤芋芽苗增殖的影响

  从表1可以看出,不同培养基中试管苗增殖系数差异较大,在NAA浓度一致时,白鹤芋不定芽增殖系数基本随着6-BA浓度增高而升高,当6-BA浓度达到1.0 mg/L时,增殖系数可达到8.53倍。但当6-BA浓度继续增加到1.5 mg/L时,芽苗增殖系数降低,且芽苗生长畸形,叶片不能正常展叶。因此,最适合白鹤芋增殖的培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+蔗糖30 g+琼脂7 g。

  表1 白鹤芋不定芽增殖效果

  


  2.3 生长素IBA对白鹤芋不定芽生根的影响

  将生长健壮的无根试管苗转接到附加IBA 0.0、0.1、0.3、0.5、1.0的1/2 MS培养基中进行生根培养。试验结果表明,白鹤芋较易生根,不同生根培养基中均可生根,生根率可达100%,但生根情况差异较大。相比IBA,培养基中添加NAA后诱导的根较短粗,数量也较少。而试验通过在白鹤芋生根培养基中附加不同浓度的IBA后发现:随着IBA浓度的增加,生根数量虽呈增加趋势,但根系生长势确有所不同。在IBA浓度较低时,根系的形成、长势等与IBA的浓度呈正相关,但当IBA浓度达到1.0 mg/L时,根系出现畸形并伴有愈伤组织生成,影响根系伸长生长;而IBA浓度为0.3~0.5 mg/L时,瓶苗根系无明显差异,详情可见表2。因此,本试验选择1/2MS+IBA0.3 mg/L+蔗糖15 g+琼脂6 g为白鹤芋最佳生根培养基。

  2.4 白鹤芋组培苗炼苗移栽

  将长势好、根系发达的生根幼苗连瓶一并转移到温室炼苗7 d左右。炼苗时,先闭瓶炼苗3~4 d后,进行开瓶炼苗。开瓶炼苗过程中,可在瓶中适当加水,以免培养基太干使幼苗失水死亡。炼苗结束后,轻轻取出瓶苗,洗去根部的培养基,移栽到装有基质(泥炭土∶珍珠岩∶椰糠=3∶1∶1)的穴盘中,浇透水,置于苗床上,适当遮荫并喷水保湿,湿度保持在70%以上[5],幼苗成活率可达90.4%。

  表2 白鹤芋不定芽生根效果

  


  3 讨论

  试验以白鹤芋的芽为外植体,通过丛生芽诱导、不定芽增殖以及生根培养等环节,建立了一套稳定的白鹤芋组培快繁体系。外植体在MS+6-BA1.5 mg/L+2,4-D2 mg/L+蔗糖30 g+琼脂7 g的培养基中,丛生芽诱导率高;在增殖培养时,当6-BA的浓度达到1.0 mg/L时,增殖系数高达8.53倍,且幼苗生长健壮;不定芽苗在附加IBA 0.3~0.5 mg/L的1/2 MS培养基中生根效果最好;白鹤芋幼苗容易移栽,成活率可达90.4%。此次试验为白鹤芋组培苗进一步商品化利用奠定了基础。

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