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如何预防在夏季时组培苗的污染问题

作者:腾昊组培室 发布时间:2018-07-04 16:01 浏览次数:

文章来源:腾昊组培室

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  在夏季进行植物组织培养时,组培苗的污染问题变得比平时要多,为了节省各项成本,提高培养成功率,如何预防组培苗的污染就成了大家广泛关注的问题,接下来就跟大家聊一聊应该如何预防此类问题。

组织培养

  要想如何预防,就要先了解污染的原因。通常是由于环境不洁、培养基和培养材料消毒不、操作过程不慎、操作人员或工具带菌而引起。污染的病原有细菌和真菌两大类。夏季温度高、湿度大,各种病原菌繁殖速度快,是组培污染的高发期,如果控制不好,导致污染严重,会造成较大的经济损失,甚至会前功尽弃。下面就给大家分享下预防的方法。

  1.洁净的组培设备和培养基的灭菌是减少污染的必然要求。培养瓶、试管等容器和封口用的盖子、耐高温的塑料膜等物品在用前要经过清洗、晾干。配制好的培养基分装后应立即高压蒸汽灭菌,即在1.1kg/cm2的压力,锅内温度达到121℃,持续保持20-30分钟。经灭菌后的培养基,放置2-3天,若培养基表面和内部无任何细菌痕迹,确实证明已灭菌,方可使用。

  2.保持干净整洁的环境是减少污染的基本要求。组培室是一个微环境,保持这个微环境的干净、整洁,能有效的防止污染。具体要做到:每周对整个组培室、组培设备进行一次的大扫除;接种室和培养室要求密闭、干燥,保持与外界环境相对隔绝的状态,尽量减少与外界的空气对流及微生物与尘埃的侵入。控制好光、温、湿、气等各种生态因子,夏季高温、高湿时,要即时降温和排湿;定期用消毒液对接种室和培养室内的设备、墙壁及地面进行擦洗;经常用70%的酒精对接种室和培养室进行喷雾降尘;定期用紫外灯对接种室和培养室进行空气消毒,每次开启30-50分钟;定期检查超净工作台上的风速和清洗过滤器。

  3.严格规范且熟练的无菌操作过程是减少污染的关键。在无菌操作过程中,工作人员严格按照无菌操作的要求,规范熟练地完成好每一个步骤,能有效地减少由操作引起的污染。具体要做到:(1)接种前,工作人员的双手必须用肥皂水洗净,进入接种室后换上工作服、戴上口罩,用70%的酒精擦拭消毒双手;(2)用70%的酒精擦拭超净工作台,接种工具(如剪刀、手术刀、镊子等)使用前要在70%酒精中浸泡,再在火焰上灼烧,冷却后使用;(3)在超净工作台上正确摆放接种用具、培养材料和培养基,台面上的东西不能堆放太多,以免影响气流;(4)接种过程中应避免他人来回走动,操作人员禁止谈话,并尽量避免操作人员头部伸入超净工作台的工作区内;(5)培养瓶的开启、接种材料的切割、分装、封口等步骤要规范熟练,避免交叉污染;(6)每切割、转接完一瓶母种材料后,要及时更换无菌纸,重新更换所用的接种工具,好备两套交替使用。

  4.培养材料(外植体和基础母瓶)的严格筛选和的表面消毒是减少污染的基础工作。选择适宜的外植体材料常常是组培工作成败的关键,通常选取生长健壮、无病斑的植株上的处于生长活跃状态的幼嫩茎尖,尤以刚刚萌发的幼芽比较理想,可以大大减少材料的污染。夏季避免阴雨天在户外采取外植体,因为阴雨天带菌较多,在晴天采材料时,下午采取的外植体要比早晨采的污染少,因为材料经过日晒后可杀死部分细菌或真菌。采集回来的外植体经自来水清洗后,在超净工作台上对其进行的表面消毒,在消毒过程中应当正确选择消毒剂的浓度和处理时间,做到既消毒,又尽量减少由消毒剂引起的组织的死亡。基础母瓶扩繁过程中,母瓶的选择也至关重要,带菌的母瓶不能再用作母种,避免污染的扩大,接种前,还应用70%酒精擦拭母瓶表面,以免开启母瓶时,灰尘落入瓶中造成污染。

  5.污染物的正确处理是防止污染传播蔓延的有效途径。组织培养中污染是经常发生的,一旦发现培养物污染,应对其进行及时处理,否则会导致培养室环境污染,造成污染的蔓延和相互传染。首先立即把污染物从培养室转移出去,然后对其进行高压消毒灭菌,再在离组培室较远的地方清除灭过菌的污染的培养物,后清洗培养瓶,晾干后待用。

组织培养

  综上所述,在植物组织培养中要想大程度预防培养基污染不仅要在组培设备组培环境中下功夫,还要提高工作人员的操作规范,当然培养的原材料也是非常重要的,后也不要忘记对污染物的科学处理哦,对于相关问题大家有什么想聊的想问的,随时欢迎您联系我们!


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